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YongChenLab@NCU

Intro block A scientific and innovative team engaged in biology/chemistry-pharmacy-medicine interdisciplinary research.

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陈勇研究员课题组开发了一种原位分离细胞核及核蛋白的新方法(原始新闻来自于南昌大学高等研究院官网-后附链接)

      在许多生物学研究领域(包括细胞生物学、分子生物学、发育生物学等)以及疾病相关的研究中,都涉及到信号通路及其相关关键分子的确定和相互作用。通过信号通路,外部刺激(或信号)由细胞外传导到细胞质再进入细胞核,通过一系列分子(包括细胞核蛋白)来调节特定基因的表达。因此,细胞核蛋白的分离和定量是信号通路研究的最重要的方面之一。细胞核及核蛋白分离纯化的质量决定了下游研究(例如常进行的蛋白免疫印迹和蛋白质组学等)的质量。至今,分离细胞核或核蛋白的方法有很多,包括超声法、酸解法、酶解法、蔗糖法、去垢剂法等。其中,去垢剂法的使用较普遍,发展了成熟的商业试剂盒。

      南昌大学高等研究院陈勇研究员的课题组在其他课题的研究过程中偶然发现,贴壁生长的细胞,在特定条件下,其细胞质成分能够被某些试剂原位剔除,只剩下仍然留在基底上的细胞表面囊泡和细胞核成分。基于此偶然发现,课题组先后发展了三种新方法:(1)发展了一种分离细胞表面囊泡的方法,并验证了分离纯化的细胞表面囊泡作为一种新型纳米药物载体的可能性(于2020年已发表在纳米生物学领域的知名学术期刊Journal of Nanobiotechnology;Zhang Y. et al. J Nanobiotechnol. 2020. 18: 69; DOI: doi.org/10.1186/s12951-020-00625-2);(2)发展了一种原位暴露细胞核及原位测量细胞核力学性质(例如刚性)的新方法(于2021年已发表在细胞生物学领域的老牌主流学术期刊BBA-Molecular Cell Research;Wang K. et al. BBA-Mol Cell Res. 2021. 1868: 118985; DOI: doi.org/10.1016/j.bbamcr.2021.118985);(3)近期又发展了一种原位分离细胞核或核蛋白的新方法,并验证了该方法的有效性,相比传统试剂盒分离方法具有更高的产率和更低的细胞质蛋白污染。传统方法将贴壁细胞变成悬浮细胞后进行后续的细胞和细胞核破碎从而获得细胞核或核蛋白,很难将细胞质蛋白去除干净。新方法是在贴壁状态下原位剔除细胞质成分(甚至可以在贴壁状态下破碎细胞核获得核蛋白),效果相当于进行了一次柱分离,因而能够显著提高产率及减少细胞质蛋白杂质(简单原理如下图所示)。新方法具有非常大的应用潜力和应用市场。

      该研究工作的成果近日已正式发表在生物学综合性权威期刊Biological Research上(doi.org/10.1186/s40659-023-00429-2),且该研究方法已获得国家发明专利授权。博士研究生秦颖和已毕业硕士研究生周云为该论文的共同第一作者,陈勇研究员为论文的通讯作者,南昌大学为成果唯一署名单位。该研究工作得到了国家自然科学基金项目、江西省自然科学基金重点项目、南昌大学学科交叉创新基金重点项目的资助。

成果原文链接:https://biolres.biomedcentral.com/articles/10.1186/s40659-023-00429-2

原始新闻链接:https://ias.ncu.edu.cn/dtxw/kydt/e75408c27e2e44f4b875c0ec351cb04b.htm

 

 

 

Created: May 05, 2023 | 15:58

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